手術室太干燥，會造成細菌增多、病人傷口不宜愈合的問題;手術室濕氣太重，又會給某些細菌提供迅速繁殖的條件。手術室氣溫太高或太低，病人和醫護人員都會感到不舒服。因此，層流凈化手術室使用過程中須注意按照季節、地域等調節溫濕度，營造舒適的溫濕環境。

據資料介紹：相對濕度低于50%，可能產生靜電火花;濕度過高，超過60%以上時，空氣培養即可出現真菌生長繁殖，因此，濕度控制在50%～60%之間。我國大部分地區屬于溫帶季風區，冬季干冷，夏季濕熱，冬季因空調影響，需要適當加濕，但也要因時制宜，比如長江中下游地區，先是梅雨，后是伏旱，溫濕度便要因時調節。

手術室內空氣的溫度也有特殊要求，因為冬季醫生不宜多空衣服，而病人手術部位要暴露出來，手術室內溫度應比一般房間溫度高些，而夏季室溫過高又會引起醫生和病人出汗，不利于手術部位的衛生和手術的順利進行，氣溫過高甚至會引起病人和醫生中暑，所以夏季手術室內溫度又應比舒適性空調房間溫度低些。

空氣的相對溫濕度過大過小都會給病人和醫生帶來不舒適感，相對濕度大還容易給某些細菌提供迅速繁殖的條件并帶來其它危害。因此，根據國外資料統計，手術室內應保持的空氣溫度：冬季為24～26℃，夏季23～26℃;全年的相對濕度為55%～60%。

為了保證層流凈化手術室恒溫恒濕，急診手術間的送風系統應24小時維持在低速運行狀態，其他手術間可根據實際情況，在手術前1小時將層流打開維持低速運行狀態，手術前30～40分鐘調至高速運行。對長時間沒有使用的手術間，啟用時應首先清潔送風口濾網，并至少提前3小時開機運行，以達到手術室空氣溫濕度和潔凈度要求。

對于更高標準的百級、千級超凈化層流手術室來說，對溫濕度的精確性要求更高，尤其要注意凈化設備的檢修和維護，一旦發現問題，要及時和凈化公司聯系，妥善維修。